您何時(shí)需要使用色譜柱呢？

　　分析非常復(fù)雜，而且性質(zhì)差異很大的混合化合物時(shí);

　　需要一個(gè)單一的方法來(lái)分離極性和非極性的可離子化或是中性化合物，而且使用可用在液質(zhì)的流動(dòng)相時(shí);

　　無(wú)法使用梯度分析時(shí);?發(fā)現(xiàn)單一的疏水或是離子作用無(wú)法產(chǎn)生足夠的分離效果時(shí);

　　不想在太多不同的色譜柱中挑選以進(jìn)行不斷的方法篩選時(shí);

　　發(fā)現(xiàn)單一疏水或是離子作用的色譜柱產(chǎn)生峰形差和柱效低時(shí);

　　進(jìn)行離子化合物的制備時(shí);

　　在分析復(fù)雜的混合物時(shí)，想節(jié)約金錢(qián)和時(shí)間；

　　菲羅門(mén)色譜柱異常沖洗步驟：

　　1、低pH的高濃度中性鹽（如0.5M硫酸鈉溶液，硫酸調(diào)pH 3.0）沖洗15倍柱體積，有助于移除堿性蛋白；

　　2、含有機(jī)溶劑（如10%-20%的甲醇、乙腈）的緩沖鹽溶液（如50mM磷酸鹽緩沖液，pH 7.0）沖洗15倍柱體積，有助于沖洗掉疏水蛋白；

　　3、加入助溶劑有助于除去固定相上強(qiáng)吸附的物質(zhì)（如通過(guò)氫鍵作用吸附等）；

　　4、按照色譜柱測(cè)試報(bào)告的進(jìn)樣條件進(jìn)對(duì)照品測(cè)試柱效；

　　菲羅門(mén)色譜柱技術(shù)的差距在哪里？

　　色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒(méi)有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門(mén)藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。

　　國(guó)內(nèi)和國(guó)外想比，我認(rèn)為色譜柱的差距在于：國(guó)內(nèi)公司以前都不會(huì)自己開(kāi)發(fā)填料，一般買(mǎi)國(guó)外現(xiàn)成填料裝柱，買(mǎi)到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因?yàn)檠b柱歷史短，經(jīng)驗(yàn)積累少，裝柱工藝也沒(méi)有*達(dá)到國(guó)外水平。另外，對(duì)色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料-----裸硅膠，國(guó)產(chǎn)的還不過(guò)關(guān)，在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國(guó)外產(chǎn)品相比，差距很大。